现在多是在form_load里验证的,你打开第二次也只是暂时的,后面让他关闭就行了. form_load之前windows form就已经生成... 把你程序读入内存就算这个程序已经被打开开始执行了...不管你放那里都是会打开第二次的... 要让他结束直接用Application.Exit()就行了.

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Private Sub Form1_Load(ByVal sender As System.Object, ByVal e As System.EventArgs) Handles MyBase.Load
If UBound(Diagnostics.Process.GetProcessesByName(Diagnostics.Process.GetCurrentProcess.ProcessName)) 0 Then
MessageBox.Show("程序已经运行了")
End
End If
End Sub
VB2008里的设置:
项目属性-应用程序-生成单个实例应用程序

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